Etanol celulósico, energias renováveis e tecnologias "verdes" tornaram-se recentemente os principais focos de biociências e biotecnologia em todo o mundo. O Brasil é um dos países líderes no desenvolvimento agrícola e produção de biomassa, que tem várias vantagens na corrida para o desenvolvimento sustentável de biocombustíveis. No entanto, uma série de obstáculos tem que ser superados para estabelecer tecnologias de transformação de biomassa lignocelulósica em biocombustíveis. A hidrólise enzimática é um dos passos mais importantes na desconstrução de biomassa no caminho para a produção de biocombustíveis de segunda geração, que tem que ser optimizado e integrado com as etapas de pré-tratamento e de fermentação para permitir uma transformação eficiente da biomassa em biocombustíveis e produtos químicos. Nesta palestra abordamos a situação atual na área, os resultados recentes de estudos de morfologia de biomassas e dos estudos estruturais de hidrolases de glicosídeos visando aumentar eficiência na depolimerização de biomassa lignocelulósica e produção e biocombustíveis avançados.